Skip to content

Микроскопия что это такое


Микроскопия - это что такое?

Важность науки в жизни всего общества отрицать очень сложно. Учёные и их разработки дали обществу всё то, чем оно теперь пользуется с радостью и наслаждается. Разработки учёных в разных областях позволяют побеждать смертельные болезни, бороться с психическими расстройствами, создавать уникальную «умную» технику и даже роботов. Возможности науки поистине безграничны. Новые лица всегда приносят с собой новые идеи, которые становятся основой для будущих разработок. Однако множество разработок базируется на простых и проверенных методах.

Многие мудрецы прошлого говорили о том, что существует макро-, микромир. На том этапе развития люди не могли осознать всю глубину этих слов. Ведь макро- и микромир действительно существуют и очень тесно взаимодействуют. Крохотные изменения в структуре клетки могут быть вызваны глобальными изменениями в Солнечной системе. На сегодняшний день доказать или опровергнуть такую взаимосвязь очень сложно, но исследования мира бактерий и клеток говорят о том, что клетка – это маленькая Вселенная.

Микроскопия

Микроскопия – это научное исследование объектов при помощи микроскопа. В переводе с греческого это слово означает «маленький, небольшой». Микроскопия может подразделяться на несколько подвидов: оптическую, многофотонную, рентгеновскую, лазерную и электронную. Цель этого способа исследования заключается в увеличенном наблюдении за объектом и регистрацией замеченных изменений.

История микроскопа

В начале своего исторического развития микроскопы представляли собой оптические приборы, которые использовали лучи видимого света. Такие приборы были очень слабы для наблюдения и подходили только для простейших операций. Идея возникновения электронного микроскопа возникла в тот момент, когда учёные задумались о замене электромагнитного излучения на электронный пучок. Это событие стало опорной точкой для развития электронного микроскопа, который значительно расширил возможности наблюдения за объектом.

Методы микроскопии

Для того чтобы правильно и тщательно обследовать какой-либо объект, необходимо работать по определённому алгоритму. Подобные алгоритмы вырабатываются один раз и применяются годами. Для того чтобы изучать окружающий мир при помощи специальной техники, необходимо владеть особыми методами. Методы микроскопии – это совокупность различных алгоритмов, следуя которым, можно основательно и системно изучить конкретный объект микромира. Прохождение пучка света через микроскоп сопровождается некоторыми изменениями первоначальных характеристик, которые могут быть вызваны структурным строением предмета. Этот процесс может сопровождаться рядов оптических эффектов, таких как отражение, поглощение, преломление, дисперсия и т.д.

Методы световой микроскопии

Световая микроскопия – это система методов, которые используют различные оптические эффекты для достоверного отображения результатов. Видимые элементы и характер полученного изображения будут во многом зависеть от освещения. Всего насчитывается большое количество методов микроскопии: светлого поля, косого освещения, интерференционного контраста, тёмного поля, поляризационный метод, фазово-контрастная, ультрафиолетовая, люминесцентная, инфракрасная микроскопия, конфокальный микроскоп.

Все эти методы имеют определённые достоинства и недостатки. При работе с образцом выбирать тот или иной метод следует исходя из его адекватности в данной ситуации. Сильные и слабые стороны каждого метода не важны в целом, главное, чтобы метод был применим в заданных условиях.

Микроскопия и медицина

Применение микроскопии в медицине имеет огромный потенциал. На сегодняшний день благодаря микроскопам можно исследовать различные клетки организма человека для того, чтобы точно определять состояние здоровья. Клетки организма дают наиболее точный и достоверный результат, который до недавнего времени было невозможно получить, так как микроскопы не могли дать исчерпывающей информации.

Использование таких приборов очень перспективно, ведь методы лечения и диагностики могут разительно преобразиться и вовсе перейти на новый уровень. Исследование с помощью микроскопов известно и применяется длительное время, однако наука стоит на пороге того, чтобы лечить человека клетками. Это уникальная возможность, которая позволит отойти от привычных методов лечения и забыть о лекарствах. Клетка – самый мощный элемент организма. Говорить о том, какую пользу может принести пересадка больному человеку здоровых клеток, просто бессмысленно, ведь это очевидно.

Исследование мочи

Общий анализ мочи – это комплекс мероприятий, которые направлены на исследование свойств мочи и её физико-химического состава. Важными показателями при этом являются цвет, запах, реакция, прозрачность, плотность, а также содержание в моче различных веществ. Микроскопия осадка мочи позволяет определить наличие солей, клеточных элементов и цилиндров. Следует понимать, что моча - это конечный продукт деятельности почек, который может очень точно отображать состояние обменных процессов и крови в организме.

Анализ осадка мочи

Микроскопия мочи позволяет создать более полную картину при полном обследовании организма. Также мазок часто используют для обычной и дифференциальной диагностики болезней мочевыводящих путей и почек. Во время лечения микроскопию мочи могут назначать для того, чтобы получить оценку эффективности докторского вмешательства. Исследование мочи позволяет выявить конкретные или потенциальные проблемы в водно-электролитном балансе организма, также в процессе обмена веществ. Анализ мочи весьма эффективен при диагностике на болезни желудочно-кишечного тракта, а также при инфекционных и воспалительных процессах в организме. Иногда микроскопию мочи используются для того, чтобы следить за состоянием пациента в период терапевтического или хирургического лечения.

Исследование крови под микроскопом

Кровяные тельца формируются в красном костном мозге, а затем выбрасываются в кровоток. Каждая клетка крови выполняет свою определённую функцию. Лейкоциты нужны для борьбы с инфекционными клетками, эритроциты способствуют обогащению клеток кислородов и удалению из них углекислого газа, тромбоциты очень важны для гемостаза. В нормальных условиях тело человека вырабатывает нормативное значение всех клеток, которое не выходит за определённые рамки. При возникновении каких-либо осложнений или при болезни клетки крови могут менять свои размеры, форму, цвет и количество. Только благодаря точному микроскопическому исследованию можно определить состояние клеток и сделать соответствующие выводы.

Кровь – это живительная жидкость организма, которая обеспечивает обмен полезными веществами между всеми клетками. Микроскопия мазка крови – это исследование, которое производится под микроскопом. Исследуется препарат, приготовленный из одной капли крови. Эта процедура входит в общий анализ крови или лейкоцитарную формулу и отдельно не совершается.

Микроскопия мазка

Для чего нужен мазок крови? Микроскопия мазка крови даёт специалисту очень важные знания о состоянии здоровья человека. При помощи этого анализа можно определить количественное соотношение эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, а также их формы и размер. Кроме того, клинический анализ крови позволяет определять количественное выражение незрелых лейкоцитов, что является очень важным моментом в ряде заболеваний. Также мазок крови позволяет качественно диагностировать заболевания, которые могут быть связаны с нарушениями функций крови, её образования, свёртываемостью, а также разрушением форменных элементов крови. Очень важной задачей микроскопического мазка на кровь является регулярное отслеживание состояния клеток крови, их зрелость после лучевой и химиотерапии, при проблемах с гемоглобином, а также при лейкозах.

Назначается мазок на кровь в том случае, если общий анализ крови показал, что увеличено количественное выражение лейкоцитов, незрелых или атипичных клеток. Для мазка можно использовать биоматериал из крови или капилляров.

Биология и микроскопы

Биология значительно расширяет возможности использования микроскопов. Как уже говорилось раньше, цитология во многом опирается на современные и мощные микроскопы. Микроскопия в биологии открывает для учёных невиданные просторы для опытов и исследований. Современные разработки позволяют уже сейчас говорить о том, какое будущее нас ждёт.

Микроскопия в биологии имеет очень широкое применение. Приборы позволяют исследовать организмы, которые недоступны глазу человека, но очень важны для научных экспериментов. В биологии чаще всего используют метод электронной микроскопии, который даёт изображение за счёт направленного потока электронов. При этом даже световой микроскоп позволяет исследовать живые биологические объекты.

Фазово-контрастная микроскопия – это один из методов, который широко применяется в микробиологии, паразитологии, гематологии. Он позволяет изучать клетки микроорганизмов, растений, животных, подсчитывать клетки костного мозга, крови. Стоит отметить, что фазово-контрастная микроскопия способна обозначать лишь контуры объектов.

Метод микроскопии в биологии применяется очень активно, так как практически все разновидности применимы для биологических исследований. Интерференционная микроскопия позволяет исследовать прозрачные жидкости и объекты, а также давать их качественный анализ. Это возможно благодаря тому, что луч света, проходя через прибор, раздваивается: одна его часть проходит через объект, а другая - мимо. Таким образом, два луча интерферируют и соединяются, давая полноценное изображение.

Микроскопия в разных областях применения

Область применения микроскопии очень широка. Несмотря на то что изначально микроскопы были предназначены для исследований в области биологии, на сегодняшний день сфера их влияния значительно расширилась. Микроскопия – это комплекс методов, который нашёл своё применение при анализе твёрдых и кристаллических тел, структуре и строений поверхностей. Также микроскопы активно используются в медицине не только для диагностики, но и при выполнении микрохирургических операций. Более того, известно, что учёными был разработан подводный лазерный микроскоп, цель которого состоит в поиске внеземной жизни на Европе.

Также не следует забывать о бурном развитии нанотехнологий, которые немыслимы без микроскопов. Развитие этой отрасли приводит к тому, что разновидности микроприборов постоянно совершенствуются. Более того, появляются новые виды микроскопов, которые предназначены для исследования определённой среды.

Подводя некоторые итоги, следует сказать о том, что микроскопия – это перспективная область, которая с каждым годом развивается всё более активно. Интерес к стволовым клеткам человека, а также развитие нанотехнологий ведёт к тому, что микроскопы становятся неотъемлемой частью любой исследовательской работы.

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ — Большая Медицинская Энциклопедия

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ — способы изучения микроскопического строения различных объектов, размеры которых находятся за пределами разрешающей способности глаза. Микроскопические методы исследования играют важную роль в бактериологических, вирусологических, цитологических, гематологических, гистологических и других исследованиях; их применяют также в фармакологии, химии, минералогии, кристаллографии и др. Среди Микроскопических методов исследования наряду с обычной световой микроскопией широко используют стереоскопическую, темнопольную, интерференционную, фазово-контрастную, поляризационную, ультрафиолетовую, электронную микроскопию и др.

Основой для развития Микроскопических методов исследования явились работы Аббе (Е. К. Abbe) но дифракционным свойствам электромагнитного излучения. С помощью теории Аббе определяют разрешающую способность микроскопов и изготавливают линзы, лишенные хроматической и сферической аберрации, объективы, дифракционные решетки, осветительный и рисовальный аппараты.

Дифракционная решетка Аббе служит для изучения явлений дифракции и состоит из системы тонких прозрачных и непрозрачных чередующихся линий, к-рые прорезают специальным резцом в толще металлического покрытия, нанесенного на стеклянную подложку.

Осветительный аппарат Аббе применяют в микроскопах для освещения объекта в проходящем свете. Он состоит из зеркала (плоского или вогнутого) и конденсора, посредством к-рых поток света направляют в плоскость объекта в виде сходящегося пучка лучей, что обеспечивает более высокую освещенность препарата и улучшает разрешающую способность микроскопа. Конденсор состоит, как правило, из двух-трех линз; ближнюю к объективу линзу устанавливают так, чтобы ее плоская поверхность была параллельна плоскости предметного столика микроскопа. При удалении конденсора от плоскости объекта яркость освещения снижается, однако возрастает контрастность изображения.

Рисовальный аппарат Аббе служит для зарисовки с гистол, препаратов. Он состоит из расположенной над окуляром микроскопа системы стеклянных призм, к-рая направляет в глаз исследователя световые лучи, прошедшие через гистол, препарат и отраженные с помощью зеркала от листа бумаги, лежащей возле микроскопа. Благодаря этому наблюдатель видит совмещенное изображение препарата и своей руки, очерчивающей, напр., карандашом контуры деталей гистол, картины препарата.

При пользовании М. м. и. важное значение приобретает правильная установка освещения, к-рую обычно проводят по методу Келера. Для этого автономный осветитель, напр. ОИ-19, располагают так, чтобы плоскость ирисовой диафрагмы осветителя находилась на расстоянии 15—25 см от центра зеркала микроскопа. Затем через закрытую на 1/2—1/3 диафрагму проецируют изображение нити лампы накаливания осветителя в центр зеркала микроскопа, прикрытого для облегчения наблюдения листом белой бумаги. Изменяя расстояние между микроскопом и осветителем, производят фокусировку изображения нити накаливания и затем зеркалом микроскопа направляют изображение в его объектив. При этом величина освещенного пятна должна совпадать с диаметром апертурной диафрагмы микроскопа, резкое изображение к-рой можно получить, изменяя положение конденсора и плоскости зеркала. В заключение раскрывают апертурную диафрагму микроскопа и с помощью макро- и микровинтов микроскопа получают яркое и четкое изображение объекта.

При работе с малыми увеличениями микроскопа этот способ не всегда позволяет получить полное и равномерное освещение поля зрения. В этих случаях снимают или отводят в сторону фронтальную линзу конденсора, применяют конденсор с большим фокусным расстоянием. При широко открытой апертурной диафрагме микроскопа изображение бывает недостаточно контрастным. В процессе диафрагмирования увеличивается контрастность изображения и возрастает глубина резкости, но может снизиться разрешающая способность микроскопа за счет нарастающих при этом дифракционных явлений. При смене объектива изображение следует снова сфокусировать в фокальной плоскости при закрытой диафрагме осветителя. В случае отклонения оси осветителя от оси объектива микроскопа края изображения могут быть освещены неодинаково. Чтобы освещенность краев изображения стала одинаковой и равномерной по всей площади поля зрения, наблюдая изображение через окуляр, перемещают осветитель.

Установку освещения по методу Келера применяют также при изучении препаратов в так наз. темном поле. В этом случае заменяют обычный конденсор темнопольным и, наблюдая в окуляр, медленно поднимают конденсор до возникновения темнопольного изображения.

Объекты, изучаемые под микроскопом, могут быть прозрачными, а также непрозрачными, т. е. изменяющими амплитудные и фазовые свойства направленного на них электромагнитного излучения. В зависимости от свойств объекта изменяются физ. свойства света — цвет (длина волны), яркость (амплитуда волны), фаза, плоскость и направление распространения волны, что используют в М. м. и. Для микроскопического исследования окрашенных объектов применяют световой микроскоп. Цвет изображения и различия в окраске нередко позволяют судить о хим. природе отдельных структур изучаемого объекта, но не дают возможности оценить его жизнедеятельность (движение, хемотаксис, слияние и др.), т.к. при окраске часто используют хим. или температурную фиксацию, убивающую биол, объект, но обеспечивающую эффективное окрашивание. В отличие от исследования фиксированных биол, объектов, витальная микроскопия основана на прижизненном окрашивании, в результате к-рого многие структуры живой клетки мало изменяются под действием специальных красителей. Витальная микроскопия может проводиться и без окрашивания, если в обычный световой микроскоп ввести темнопольный конденсор.

Самостоятельным вариантом темнопольной микроскопии (см.) является ультрамикроскопия, при к-рой мельчайшие частицы изучаемого объекта освещают боковым пучком света и на темном фоне они выглядят в виде точек. С помощью ультрамикроскопа (см.) удается измерять частицы и определять нек-рые свойства изучаемых объектов.

Для фазово-контрастной и амплитудно-контрастной микроскопии применяют микроскопы, в к-рых луч света подвергается дифракции в зависимости от особенностей изучаемого объекта; при этом изменяется длина и фаза волны света. Живые микроскопические объекты в световом микроскопе выглядят прозрачными и почти не изменяют амплитуды и цвета светового луча и вызывают лишь сдвиг фазы его волны. Лучи света, прошедшие через изучаемый объект, отклоняются от вложенной в объектив специальной полупрозрачной фазовой пластинки, и, т. о., между лучами фона и объекта возникает разность длины волны. Если эта разность достигает 1/4 длины волны, то возникает заметный для глаза эффект, когда темный объект отчетливо виден на светлом фоне или, наоборот, в зависимости от структуры фазовой пластинки (см. Фазово-контрастная микроскопия). Пластинки, изменяющие только яркость и цвет фона, используют в амплитудно-контрастном или аноптральном микроскопе. Амплитудно-контрастное устройство может быть установлено также на биол, микроскоп. Эти микроскопы значительно расширяют возможности прижизненного исследования биол, объектов без предварительной фиксации и окраски препарата.

Интерференционная микроскопия построена примерно на тех же принципах, что и фазово-контрастная, но, в отличие от нее, дает возможность получать количественные данные. С помощью интерференционного микроскопа можно измерять разность фаз, вызываемую различными клеточными структурами, и определять их массу. Последовательные измерения разности фаз в двух средах с известными показателями преломления дают возможность одновременно определять толщину объекта, концентрацию сухого вещества, содержание воды и позволяют косвенным образом судить о клеточном метаболизме, проницаемости мембран, активности ферментов. Интерференционная микроскопия находит применение в цитол, исследованиях, используется для количественного анализа клеточных структур живых объектов, напр, культур тканей, простейших и т. п.

Поляризационная микроскопия основана на различном преломлении структурными компонентами клеток и тканей поляризованного света. В одних из них свет распространяется с одинаковой скоростью независимо от плоскости поляризации (изотропные структуры), в других — скорость распространения поляризованного света зависит от направления его по продольной или поперечной оси объекта (анизотропные структуры). Ряд биол, объектов (миофибриллы, мерцательные реснички и др.) имеет строгую молекулярную ориентацию, является анизотропным и обладает двойным лучепреломлением. Поляризованный свет формируют при помощи специальных поляризаторов — пленчатых поляроидов или призм Николля, к-рые помещают в микроскопе между источником света и изучаемым объектом. Образованный ими пучок плоскополяризованного света разлагается на два луча, поляризованных во взаимно перпендикулярных плоскостях. Один из этих лучей проходит через анизотропные структуры объекта, запаздывая относительно другого. При выходе из объекта оба луча оказываются в разных фазах. Когда показатель преломления вдоль структуры больше, чем в поперечном направлении, говорят о положительном двойном лучепреломлении, при обратных отношениях — об отрицательном двойном лучепреломлении. Структуры клетки, образованные ориентированными белковыми молекулами, обладают собственным положительным двойным лучепреломлением. Характер лучепреломления поляризованного света, величина анизотропии в сочетании с изменением этих оптических показателей после экстракции жирорастворителями позволяют судить о молекулярной организации структуры. Напр., в результате исследований миелиновых оболочек нервов с помощью поляризационного микроскопа было обнаружено радиальное по отношению к продольной оси нерва расположение молекул липоидных веществ и перпендикулярное по отношению к ним расположение макромолекул белка. Сходное расположение белково-липоидных элементов обнаруживается в эритроцитах и хлоропластах. С помощью поляризационного микроскопа в гаверсовых системах трубчатых костей обнаружены пластины с продольной и циркулярной ориентацией фибрилл. Кроме того, по характеру двойного лучепреломления изучают форму вирусов, белковых макромолекул и т. п.

В поляризованном свете можно исследовать как окрашенные, так и неокрашенные тканевые срезы, приготовленные на замораживающем микротоме или залитые в парафин. В частности, липиды и миелин исследуют на замороженных срезах, тогда как исследование поперечнополосатой мышечной ткани и кристаллов можно производить как в парафиновых, так и замороженных срезах. Двойное лучепреломление коллагена, отчетливо проявляющееся в таких средах, как капрат целлюлозы или смолы, может полностью утрачиваться в препаратах, заключенных в смесь глицерин-желатин.

В научных и практических исследованиях широко применяют люминесцентную микроскопию (см.), для к-рой используют ультрафиолетовые лучи или сине-фиолетовую часть спектра. Нек-рые внутриклеточные образования, напр, липиды, обладают собственной (первичной) люминесценцией (см.). Другие компоненты клетки могут люминесцировать после предварительной окраски так наз. флюорохромами (см.).

Ультрафиолетовая микроскопия используется в цитол, и гистохимических исследованиях. Она позволяет изучать локализацию, количественное распределение в клетках и тканях высокомолекулярных соединений (белки, нуклеиновые кислоты) и наблюдать за их динамикой в процессе жизнедеятельности. Этот метод дает возможность без предварительной фиксации и окраски препаратов рассматривать исследуемый материал, напр., с целью прижизненного изучения микрообъектов.

Ультрафиолетовая абсорбционная микроскопия основана на способности нек-рых веществ, входящих в состав тканей и клеток, прозрачных в видимом свете, поглощать ультрафиолетовые лучи с определенной длиной волны.

При исследовании живых или фиксированных неокрашенных объектов возрастает контрастность изображения за счет избирательного поглощения ультрафиолетовых лучей высокомолекулярными соединениями. В частности, важное значение ультрафиолетовая микроскопия имеет для изучения распределения в клетке нуклеиновых к-т, поглощающих ультрафиолетовое излучение в участке спектра ок. 260 нм. Поглощение ультрафиолетового излучения белками зависит от входящих в их состав ароматических аминокислот (тирозина, триптофана, фенилаланина), дающих максимум поглощения в участке спектра ок. 280 нм. Для получения наглядного представления о распределении в препарате веществ изучаемый участок фотографируют в ультрафиолетовом свете с разной длиной волн. В последующем фотоснимки переснимают на цветную пленку в хромоскопе, в к-ром перед снимком, сделанным в коротковолновых лучах, помещают синий светофильтр, в лучах средней длины — зеленый и в длинноволновых лучах — красный светофильтр. Эти снимки с помощью специального приспособления совмещают на экране, и изображение становится видимым, передавая условными цветами различия поглощения ультрафиолетовых лучей отдельными структурами клетки.

Ультрафиолетовую флюоресцентную микроскопию, как и абсорбционную, используют для цитохимического изучения живых или фиксированных неокрашенных объектов, в связи с тем что спектры ультрафиолетовой флюоресценции веществ отличаются друг от друга.

Инфракрасная микроскопия дает возможность установить структуру объекта по характеру поглощения света с длиной волн 800—1000 нм. Широкое распространение имеет исследование в инфракрасном свете веществ, частично или полностью непрозрачных в ультрафиолетовой и видимой областях спектра. Для инфракрасной микроскопии биол, объекты не подвергают дополнительной хим. обработке. При помощи инфракрасного микроскопа производят исследование импрегнированной нервной ткани и капилляров в гистол, срезах, распознают повреждения сетчатки и радужной оболочки глаза.

Стереоскопическая микроскопия позволяет исследовать непрозрачные объекты и создает эффект объемного изображения. Ее применяют, напр., для исследования секционного, операционного и биопсийного материала, для проведения работ с помощью метода макромикроскопии (см.). В судебной медицине стереоскопическую микроскопию используют для изучения органов и тканей трупа, а также для исследования различных вещественных доказательств (см.).

Для повышения разрешающей способности М. м. и. создают оптические системы, основанные на электромагнитных линзах с применением в качестве источника излучения потока электронов, напр, для электронной микроскопии (см.) используют пучок быстрых электронов, а роль линз выполняют электрические и магнитные поля определенной конфигурации. Разновидностью электронной микроскопии является сканирующая (растровая) микроскопия, к-рая дает возможность получить объемное изображение объекта за счет излучаемых им вторичных электронов.

В нек-рых микроскопах плавное, бесступенчатое увеличение без смены объектива позволяет в пределах широкого диапазона установить интересующие детали объекта, напр, динамику биол, процессов, происходящих в тканевых культурах.

См. также Микроскоп, Окраска микроорганизмов.


Библиография:

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования, пер. с нем., М., 1959, библиогр.;

Биофизические методы исследования, под ред. Ф. Юбера, пер. с англ., М., 1956; Де Робертис Э., Новинский В. и Саус Ф. Биология клетки, пер. с англ., с. 94, М., 1973; Дитчберн Р. Физическая оптика, пер. с англ., М., 1965; Ильин P. С., Федотов Г. И. и Федин Л. А. Лабораторные оптические приборы, М., 19 66, библиогр.; Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия, пер. с англ., с. 7, М., 1969; Скворцов Г. Е. и др. Микроскопы, Л., 1969, библиогр.


что это такое, как делается

Микроскопическое исследование мазка (микроскопия мазка) — исследование биоматериала (соскоба) из влагалища, цервикального канала, уретры под микроскопом. Мазок может быть предварительно окрашен или не окрашен (нативный мазок). Микроскопическое исследование проводится с помощью светового микроскопа под различными увеличениями.

Содержание статьи:

В настоящий момент микроскопическое исследование мазка является комбинированным, состоящим из применения светового микроскопа и цифровой фотографии со специальными компьютерными программами, позволяющими увидеть максимально подробно содержимое материала. Это значительно повышает результативность процедуры. Микроскопическое исследование мазка может быть проведено как мужчинам, так и женщинам: в обоих случаях взятие мазкого материала из уретры возможно.

В ходе процедуры исследования мазка и взятого мазкого материала определяется соотношение организмов в микрофлоре: нормальных, патогенных, условно-патогенных микроорганизмов. На основании этого анализа делается вывод о состоянии микрофлоры, наличии воспалительных процессов и степени их выраженности. В мазке на флору смотрится количество лактобацилл, эпителия, лейкоцитов, эритроцитов, а также патогенной и условно-патогенной флоры.

Показаниями в гинекологии к микроскопическому исследованию являются симптомы половых инфекций, влагалищные выделения, выделения из уретры, патогенная флора и так далее.

Микроскопическое исследование мазкого материала, взятого у пациентки, проводится в ходе плановых осмотров во время I и III триместра беременности, в ходе ежегодного планового осмотра здоровых женщин в целях профилактики, при подготовке к некоторым видам инструментальной диагностики и исследований. Также проводится взятие материала и при подозрениях на воспалительные процессы и инфекции в половой системе женщины.

Взятие мазка требует комплекса подготовительных процедур. Нельзя применять вагинальные свечи, антибактериальные средства интимной гигиены и лечения. Требуется воздержаться от спринцевания и половых актов за 36 часов до проведения процедуры. Перед взятием материала следует проводить гигиенические процедуры только наружных половых органов, посещение туалета и опорожнение мочевого пузыря не должно происходить за 2-3 часа до исследования. Что касается сроков взятия материала, то специалисты рекомендуют делать это на 5-7 день после менструации. Во время нее проводить процедуру нельзя. Кроме того, за неделю до проведения исследования требуется воздержаться от применения препаратов химиотерапии, лечебных процедур и так далее.

Процедура взятия мазка на флору

Тщательность забора материала у женщин играет особую роль, поскольку в случае несоблюдения алгоритма результат исследования мазкого содержимого может оказаться ложным. В случае некоторых заболеваний, например, хламидиоза, возбудители инфекции локализуются в цервикальном канале и отсутствуют в самом влагалище.

Для проведения процедуры используются два предметных стекла, предварительно обработанных эфиром для обезжиривания и ликвидации лишних налетов. На стеклах специальным карандашом наносится маркировка уретры, шейки матки, влагалища (U, C, V соответственно). Как было сказано ранее, взятие мазка предшествует некоторым видам диагностики: мануальному осмотру, кольпоскопии, лечебным манипуляциям во влагалищной зоне и так далее.

Первоначально берется мазкий материал из уретры. Ее массируют пальцем, в результате чего возможно осуществить забор содержимого. Первые выделения удаляются ватным шариком, последующие забираются для исследования методом легкого поскабливания ложечкой Фолькмана — специализированным шпателем, обязательно стерильным. Содержимое, полученное в результате поскабливания, наносится на стекла с соответствующей маркировкой. Далее вводится зеркало, обнажается шейка матки, протирается ватным шариком. Новым шпателем собирают содержимое из цервикального канала (также методом поскабливания). В окончании процедуры производится забор содержимого заднего свода влагалища. Взятые мазки также наносятся на предметные стекла в соответствии с маркировками. Перед отправкой в лабораторию для микроскопии мазки высушиваются на открытом воздухе.

Важно соблюдать стерильность на каждом этапе взятия материала. Обязательно использование именно отдельных шпателей. Перчаткой мануально осуществить забор материала нельзя. Процедура проходит безболезненно и практически неощутимо для пациентки.

Микроскопия мазка на флору

Лабораторная микроскопия полученного материала осуществляется в течение дня либо за 15 минут в ускоренном режиме. В лаборатории мазки окрашиваются специальными красителями и микроскопируются под различными увеличениями. В гинекологии при исследовании мазка на флору одно стекло окрашивается синим митиленовым, другое — по Грамму, то есть кристаллическим фиолетовым или обесцвечиваются в спирте. Бактерии, окрашенные по Грамму, могут принимать разную окраску в зависимости от положительного или отрицательного характера микробов.

При микроскопии мазков из заднего свода влагалища определяют степень чистоты содержимого. Мазки, полученные из шейки матки и уретры, исследуются на предмет флоры и содержание гонококков.

Степени нормы определяются следующим содержимым: должны присутствовать клетки плоского эпителия из шейки матки и влагалища. Отсутствие клеток говорит о недостатке гормонов эстрогена, избыточном количестве андрогенов или же об атрофическом состоянии эпителиального слоя. Повышенное количество лейкоцитов говорит о воспалительном процессе во влагалище — кольпите. Количество лейкоцитов определяет степень тяжести заболевания.

Наличие некоторого количества золотистого стафилококка говорит о норме флоры. Увеличенное количество говорит о воспалении во влагалище или слизистой оболочке матки.

Что касается содержания микроорганизмов, то в норме допустимо содержание только лактобацилл. Присутствие стрептококков, пневмококков, стафилококков, энтерококков, гонококков, грибков, анаэробов говорит о наличии инфекции в области уретры.

При обнаружении отклонений от норм проводится ряд дополнительных диагностических лабораторных исследований, например, ПЦР.

Оценка результата микроскопического исследования мазка на флору

В гинекологии выделяются несколько степеней чистоты влагалищного содержимого, полученного из результатов исследования мазка микроскопией. Все эти степени характеризуют нормальную, условно-патогенную и патогенную флору.

Первая степень чистоты обусловлена кислой средой, наличием лактобацилл, отдельных эпителиальных клеток. Вторая степень чистоты характеризуется уменьшенным количеством бацилл во влагалище, небольшим количеством сапрофитов, кислой средой, единичными кокками и лейкоцитами. Первая и вторая степени чистоты относятся к норме состояния флоры.

Третья степень чистоты отличается повышенным количеством лейкоцитов, отсутствием лактобацилл, наличием микробов во флоре. Среда становится щелочной. Четвертая степень чистоты отличается патогенной флорой, большим количеством микробов и лейкоцитов. Третья и четвертая степени чистоты к норме не относятся и говорят о наличии заболеваний и нарушений во флоре.

При третьей и четвертой степенях чистоты, установленных в ходе исследования мазка микроскопией, проводятся некоторые диагностические исследования, взятие материала также не может быть осуществлено.

Важно отметить, что при получении результатов врачом-гинекологом учитывается анамнез и клиническая картина. Точность соблюдения алгоритма взятия мазков обуславливает точность полученного результата.

Микроскопические исследования влагалищного содержимого на флору проводятся во многих клиниках Москвы и Московской области. Контактные данные и справочную информацию о них, а также прайс на услугу вы можете найти на нашем сайте.

Микроскопия мазка крови

Микроскопия мазка крови

Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.

Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.

Синонимы русские

Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.

Синонимы английские

Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную или капиллярную кровь.

Общая информация об исследовании

Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови, а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.

Мазок периферической крови – это "моментальный снимок" клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45' и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.

Для чего используется исследование?

Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.

Когда назначается исследование?

Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. Обнаружение в мазке патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.

Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.

Что означают результаты?

Референсные значения

Нейтрофилы - палочк.: 0 - 5 %.

Нейтрофилы - сегмент.

Возраст

Референсные значения

До 1 года

16 - 45 %

1-2 года

28 - 48 %

2-5 лет

32 - 55 %

5-7 лет

38 - 58 %

7-8 лет

41 - 60 %

8-12 лет

43 - 60 %

12-16 лет

45 - 60 %

Больше 16 лет

47 - 72 %

Лимфоциты, %

Возраст

Референсные значения

До 1 года

45 - 75 %

1-2 года

37 - 60 %

2-4 года

33 - 55 %

4-6 лет

33 - 50 %

6-8 лет

30 - 50 %

8-10 лет

30 - 46 %

10-16 лет

40 - 45 %

Больше 16 лет

19 - 37 %

Моноциты, %

Возраст

Референсные значения

До 1 года

4 - 10 %

1-2 года

3 - 10 %

Больше 2 лет

3 - 12 %

Эозинофилы, %

Возраст

Референсные значения

До 1 года

1 - 6 %

1-2 года

1 - 7 %

2-4 года

1 - 6 %

Больше 4 лет

1 - 5 %

Базофилы, %: 0 - 1 %.

Причины изменения показателей

Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Врач общего профиля, терапевт, хирург, инфекционист, гематолог.

Методы микроскопии применяемые в медицине.

Хотя бы один раз в год все люди проходят медицинские осмотры. Но мало кто знает, что происходит с их анализами в лаборатории, и какие диагностические мероприятия с ними проводят. А ведь от правильного лабораторного обследования зависит не только здоровье, но иногда даже жизнь. Поэтому методы микроскопического исследования играют немаловажную роль в выявлении и своевременном предупреждении различных вирусных и инфекционных заболеваний.

Микроскопия – исследование объектов посредством микроскопа. Предназначена для изучения микроорганизмов, а также иных объектов, которые непостижимы человеческому глазу. Имеет следующую классификацию:

  • Стереоскопическая.
  • Используется для исследования объектов под разными углами, при этом изучая их двумя глазами. Увеличение небольшое – 120-ти кратное. Такой вид микроскопии используют в оперативном лечении маленьких структур организма, которые недосягаемы для человеческого глаза; в изучении мёртвых тканей; в судебной медицине.

  • Инфракрасная.
  • Принцип действия – поглощение непрозрачных объектов, структурами света, длина волн которых достигает 700-1200 нанометров. Чтобы провести инфракрасную микроскопию не нужно производить специальную химическую обработку объекта. Данный метод применяется в зоологии, науках о биологической природе человека. Используется микроскопия в медицине: инфракрасную микроскопию используют в нейрохирургических целях, а также при изучении глаз, их анатомии и физиологии.

  • Ультрафиолетовая.
  • Изучает свойства объекта посредством определения длины волн, которые поглощают ультрафиолетовое излучение, являясь способностью отдельного вещества, клетки, ткани данного объекта. Такой способностью обладают биополимеры, которые хранят генетический код; нуклеиновые кислоты; пропионовые кислоты; альфа-аминокислоты; калиевая соль; продукты азотистого обмена; лекарственные вещества; кристаллические вещества с температурой плавления больше 290 градусов. Благодаря ультрафиолетовой микроскопии определяют место концентрации искомых веществ, а, если объект живой, то можно исследовать его структурные изменения в процессе жизнедеятельности.

  • Люминесцентная.
  • Основной принцип работы – изучение объектов посредством их свойств свечения в ультрафиолетовых лучах или сине-фиолетовой части спектра. Большинство биологических веществ, например, белки, молекулы небелковой природы, низкомолекулярные органические соединения и лекарственные препараты имеют «врожденную» люминесценцию. Иные вещества светятся лишь после добавления конкретных красителей – синтетических соединений природного характера, которые начинают светиться при контакте с ультрафиолетовыми и синими лучами. Такой краситель может попадать в клетку при малейшем контакте, а может распределяться по клеткам избирательно, окрашивая при этом отдельные биосоединения изучаемого объекта. В мероприятиях, посвященных гистохимическим исследованиям, метод люминесцентной микроскопии – это единственный способ обнаружить вирусную концентрацию в клетках, изучить структуру распада продуктов обмена веществ, определить антигены и антитела. Лечение таких болезней, как герпес, гнойное поражение железистых органов, воспаление тканей печени, грипп – не обходится без люминесцентной микроскопии. Также, с ее помощью можно распознать злокачественную опухоль, предупредить сердечно-сосудистые заболевания, исследовать микрофлору слизистой оболочки носа и диагностировать вирусные недуги.

  • Интерференционная.
  • Имеет общую структуру анализа с фазово-контрастной микроскопией, но в отличие от последней, где можно изучать лишь контуры исследуемого объекта, здесь появилась возможность делать микроскопическую экспертизу прозрачных объектов, а также брать количественный анализ. Такой результат появляется вследствие преломления луча света на два пучка: первый проходит через структурные компоненты изучаемого объекта, а второй минует их. В объективе микроскопа кажется, что оба пучка соединяются и налагаются друг на друга. Разница фаз, которая возникает, можно измерить посредством определения массы разнообразных клеточных структур. Если измерять данную разницу последовательно, используя показатели преломления, то можно узнать плотность, ширину и толщину изучаемых объектов и их тканей, содержится ли в них вода или иные компоненты, имеется ли в них белок. Химические и физические свойства мембран, активность ферментов, обмен веществ на клеточном уровне – это лишь малая часть того, что можно узнать благодаря интерференционной микроскопии.

  • Фазово-контрастная.
  • Применяется при изучение живых неокрашенных объектов. Принцип действия – преломление луча света по отношению к излучаемому объекту. При этом видоизменяются размер и фаза волны. Фазово-контрастный микроскоп состоит из объектива с элементами, которые расщепляют поляризованный пучок света на несколько компонентов. Свет луча, который проходит сквозь объект через эти элементы, не изменяет свой цвет и амплитуду, но немного нарушается фаза его волны. Как вывод – разница размеров волн между проходящими сквозь объект лучами и световым фоном. В случае, если разница не меньше 0,25 длины волн – возникает изображение, на котором чёрный объект выделяется из светлого фона. Всё зависит от фазовой пластинки, встроенной в объектив микроскопа. Одним из подвидов данного метода микроскопии является амплитудно-контрастная, принцип действия которой строится лишь на изменении яркости и цветовой палитры фонового света. При этом улучшается качество изучения живых неокрашенных организмов. Своё применение амплитудно-контрастная микроскопия нашла в исследованиях заболеваний системы кровообращения; онкологии; биомедицины; паразитов, а также заболеваний, которые они вызывают; микробиологии и анатомии.

  • Рентгеновская.
  • Применяется для исследования особо малых объектов, которые по своим размерам не больше рентгеновской волны (0,01-1 нм). Подразделяется на следующие подвиды: проекционная, работающая посредством источника излучения и регистрирующего устройства; отражательная – использует специальные монокристаллы, система зеркал, рассеянное на кристалле рентгеновское излучение.

    Своё применение рентгеновская микроскопия нашла в изучении генезиса минералов, медицине, а также науке, изучающей химический состав и структуру металлов. Отличительной особенностью данного метода является возможность изучать непрепарированные живые клетки.

    Этот рентгеноструктурный анализ может быть лазерным – когда изучаются одиночные молекулы и их связи.

  • Поляризационная.
  • Лучи, которые появляются посредством поляризации двух взаимоперпендикулярных полостей, образуют свет, в котором исследуют различные объекты – это и есть принцип действия поляризационной микроскопии. Между источником излучения и объектом помещают специальные призмы с эффектом двойного лучепреломления, которые отражают электромагнитные и звуковые волны. В сочетании со специальным светофильтром, такая конструкция позволяет изучать анизотропные структуры клеток, микроскопические компоненты тканей, молекулярную организацию структуры объекта. Поляризационная микроскопия используется для исследования клеток и тканей растительных и животных организмов. Также применяется при идентификации возбудителя различных иммунных заболеваний; при изучении жизни клеток, их жизненно важных компонентов, их функций и процесса размножения. Основное назначение данного метода исследования – изучение животных и растительных тканей, минералов, анизотропных микрообъектов.

  • Электронная.
  • Применяется в случае, если объект находится вне пределов видимости оптического микроскопа. Обычно, размер исследуемых образцов, которые изучаются данным методом – 1 микрон и менее. Принцип действия заключается в использовании потока отрицательно заряженных частиц, которые играют роль светового луча. Линзы в таком микроскопе – магнитные. Отдельные участки исследуемых объектов по-разному задерживают отрицательно заряженные частицы, поэтому изображение получается чёрно-белым, где сам объект увеличен в тысячи раз. Сегодня электронная микроскопия используется для изучения строения, функции и развития клетки. Также применяется в сферах исследования морфологии и структуры микроорганизмов, их жизнедеятельности и генетики. Немаловажный вклад данный метод внес в развитие такой науки как вирусология. Если бы не электронная микроскопия, законы жизнедеятельности клеток были бы до сих пор не изучены, а значит многие онкологические заболевания были бы неизлечимы.

    Для того, чтобы провести электронную микроскопию, объекты, которые являются изучаемым материалом, подвергаются физической и химической фиксации, после чего их обезвоживают и разделяют на ультратонкие срезы, чтобы было легче их контрастировать и исследовать.

    Электронная микроскопия позволяет увеличивать изображение объекта на много сотен тысяч раз. Минусом данного метода я является то, что он предназначен для изучения неактивных, обезвоженных, мёртвых объектов. Научный вклад в медицину этой методики микроскопии – очень велик, но применять ее в диагностических и практических целях – пока невозможно. Световая и электронная микроскопия имеет общий признак – увеличение изображения с последующим описанием форм объекта и сравнением этих форм с функциональными, а также химическими свойствами

  • Иммуноэлектронная микроскопия.
  • Применяется для исследования взаимодействия антигена и антител. Принцип действия: материал, который исследуется смешивают с иммунной сывороткой, инкубируют его; жидкость и твердые частицы разделяются на фракции по плотности; затем происходит осаждение антител и разделенных частиц на объект; после этого, к смешанному клеточному осадку добавляют вещество, усиливающее контрастность; и только после всего этого, полученный препарат исследуют под микроскопом.

    Применяется для диагностики вирусного гепатита, а также для выявления антигенов, которые будут бороться с различными вирусными заболеваниями.

  • Световая.
  • Обеспечивает цветное изображение, увеличенное в две-три тысячи раз. Также, при световой микроскопии возможно продолжительное наблюдение за подвижным объектом, и что немаловажно – микрокиносъёмка. Используется для оценки хода развития объекта, его состояния движения, а также для исследования его изменений под воздействием окружающих его факторов. Кроме разрешающей способности микроскопа, важную роль играет амплитуда светового луча и типология исследуемого объекта, так как свойства последнего имеют огромное влияние на оптическое излучение: цвет, контрастность, резкость, световая фаза, плоскость, по которой распространяется волна. Именно благодаря этим факторам и строится методология микроскопических исследований, например, в данном виде микроскопии, объект окрашивают, чтобы определить его свойства, потому что краска помогает изучить конкретные свойства убитых клеток. Но это не значит, что световая микроскопия занимается изучением лишь мертвых биологических объектов. Благодаря темнопольной микроскопии (подвид оптической), где свойства и чёткость изображения зависит ли излучения, которое рассеивается исследуемым образцом, освещающий световой пучок не попадает в глазок, и картинку изучаемого образца учёные видят в рассеянном свете. Используется для изучения водных одноклеточных организмов, а также живых объектов, которые могут быть как окрашенными, так и наоборот.

    Методы микроскопии | Кинезиолог

     Определение понятия

    Микроскопические методы исследования – это способы изучения очень мелких, неразличимых невооруженным глазом объектов с помощью микроскопов. Широко применяются в бактериологических, гистологических, цитологических и других исследованиях.

    Микроскопия - один из главных методов диагностики инфекционных и инвазионных заболеваний, позволяющий определить вид возбудителя по форме, размерам, строению оболочки, цитоплазмы, ядра, взаиморасположению и способности окрашиваться определенными красителями; обнаружить яйца и личинки гельминтов, их фрагментов, вегетативных и цистных форм патогенных простейших.

    Микроскоп – это оптический прибор, имеющий как минимум двухступенчатое увеличение. И одно из них принадлежит окуляру, который играет роль лупы. Только в отличие от бытовой лупы, окуляр имеет постоянное увеличение, его положение в микроскопе определено и жестко закреплено стандартом (высота окуляра).

    Любой оптический микроскоп имеет базовые узлы, функциональное назначение которых не меняется от типа, класса прибора или страны производителя. Разница только в конструкторском и технологическом решениях, предложенных специалистами фирм-разработчиков, а также уровне мирового научно-технического прогресса. И как бы микроскоп не назывался – световой, цифровой, видеомикроскоп, фотомикроскоп, лазерный сканирующий микроскоп, анализатор изображения – в его основе будет базовый световой микроскоп, принцип которого был разработан еще Левингуком, Ньютоном, Карл Цейсом, Эрнстом Аббе.

    Микроскоп – это оптико-механо-электрический прибор, объединяющий в себе три функциональные части:
    · функция воспроизводящей системы – воспроизвести (создать, сформировать) изображение объекта таким образом, чтобы оно как можно точнее передавало детали объекта с соответствующим разрешением, увеличением, контрастом и цветопередачей;
    · функция визуализирующей системы – передать изображение объекта, созданное воспроизводящей системой микроскопа, таким образом, чтобы оно с небольшим дополнительным увеличением (или без него) было видно достаточно резко на сетчатке глаза, фотопленке или пластинке, на экране телевизора или монитора компьютера;
    · функция осветительной системы – создать световой поток, позволяющий осветить объект таким образом, чтобы воспроизводящая система микроскопа предельно точно могла выполнить свою основную функцию. При этом совместная работа обоих систем должна обеспечивать визуализацию изображения с использованием физико-химических свойств объекта.

    Важнейшей характеристикой каждого объектива микроскопа является его разрешающая способность. Разрешающей способностью называется расстояние между двумя точками, при котором они видны раздельно (т.е. не сливаются в одну).

    Для полного использования разрешающей способности иммерсионного объектива необходимо выполнять следующие основные правила:
    1) Конденсор осветительного аппарата должен быть поднят до отказа (до уровня предметного столика).
    2) Диафрагма конденсора полностью открыта.

    Во всех без исключения случаях работа ведется с применением встроенной подсветки или плоского зеркала, так как конденсор рассчитан на работу с параллельными пучками света.
    Одной из важных характеристик объектива является его свободное рабочее расстояние, т.е. расстояние между верхней поверхностью препарата и нижней поверхностью фронтальной линзы объектива при наведенном на фокус объективе. Эти расстояния следующие:
    для объектива с увеличением 10х – 0,25 мм;
    для объектива с увеличением 40х – 0,65 мм;
    для объектива с увеличением 100х – 1,25 мм.
    Знание этих расстояний необходимо для того, чтобы быстро сфокусировать объектив на препарат.

    Классификация микроскопов

    Микроскопы по объекту исследования можно разделить на следующие основные виды:
    - микроскопы плоского поля – это микроскопы, оптическая схема которых обеспечивает воспроизведение объекта в двумерном пространстве – двумерное изображение. Объекты исследования – тонкие, в среднем, толщиной от 10 мм до 0,1 мм, просматриваемый слой от 1 мм до 0,001 мм. В этих микроскопах возможно наблюдение объемного изображения в пределах 100-200 мкм по высоте за счет особых способов освещения.
    - стереоскопические микроскопы - это микроскопы, оптическая схема которых обеспечивает воспроизведение объекта в трехмерном пространстве – объемное, трехмерное изображение. Объекты исследования – габаритные, в среднем, толщиной от 100 мм до 1 мм, просматриваемый слой по высоте/глубине – от 50 мм до 0,5 мм, и плоские.
    Конструктивно микроскопы могут быть выполнены в двух вариантах:
    - прямые микроскопы (классическое построение схемы) – наблюдательная часть микроскопа расположена сверху объекта. Это относится к микроскопам плоского поля и стереомикроскопам.
    - инвертированные микроскопы (перевернутое построение схемы) – наблюдательная часть микроскопа расположена снизу объекта. Это относится только к микроскопам плоского поля.

    По построению изображения микроскопы можно разделить следующим образом:
    - микроскопы светлого поля – на светлом фоне более темное изображение объекта. Освещение: обычный прямо проходящий свет.
    - микроскопы с методом косого освещения – на сером фоне контрастное изображение объекта с неровным по толщине контуром. Освещение: обычный прямо проходящий свет частично перекрывается до того, как попадает объект.
    - микроскопы с методом темного поля – на темном фоне более светлое изображение объекта или ярко блестящий контур объекта. Освещение:
    а) в микроскопах проходящего света – обычный прямо проходящий свет полностью перекрывается до того, как попадает на объект;
    б) в микроскопах отраженного света - обычный свет, проходя через кольцевую диафрагму с непрозрачным диском, по размеру перекрывающим выходной зрачок объектива.
    - микроскопы с методом фазового контраста – дают возможность с максимальной степенью визуализации и детальности наблюдать на сером фоне более темное «объемное» изображение объекта, окруженное по контуру светлой полосой; при негативном (темнопольном) фазовом контрасте картина обратная. Освещение: обычный прямо проходящий свет перекрывается, но в два этапа – часть света до объекта, а затем после объекта прошедшая часть света перекрывается с ослаблением. При этом свет в виде светового кольца определенной площади проходит через объект, а затем после объекта – через полупрозрачное кольцо в объективе.
    Кроме того в парке микроскопов имеются специализированные микроскопы :
    - люминесцентные микроскопы – обеспечивают возможность наблюдения на темном фоне свечения объектов. Освещение: обычный прямо падающий свет определенной длины волны попадает на объект, изображение объекта строится в другой длине волны; выделение соответствующих областей спектра происходит с помощью сложной системы блоков интерференционных светофильтров.
    - поляризационные микроскопы – на сером или темном фоне разноцветное, четкое или контрастное изображение. Освещение: обычный прямо проходящий свет с помощью поляризатора в осветительной системе превращается в линейно-поляризованный свет, после объекта с помощью анализатора происходит выделение из структуры изображения тех элементов, которые связаны с анизотропией объекта.
    - микроскопы дифференциально-интерференционного контраста или интерференционного контраста – на однотонном цветном фоне яркое цветное «объемное» изображение или изображение того же цвета, что и фон, с окантовкой из другого цвета. Освещение: обычный прямо проходящий свет с помощью поляризатора в осветительной системе превращается в линейно-поляризованный свет, после объекта с помощью специальной призмы и анализатора происходит создание объемного цветного контрастного изображения.
    - ультрафиолетовые и инфракрасные микроскопы – освещение и наблюдение объекта с помощью электронно-оптических преобразователей вне видимого диапазона: до 400 нм и свыше 700 нм.

    - лазерные микроскопы - освещение и наблюдение объекта с помощью лазерного излучения (смотрите пример ниже).

    Порядок работы со световыми микроскопами
    · Проверить состояние осветительного аппарата: поднять конденсор, открыть его диафрагму, включить питание и для установки интенсивности освещения медленно повернуть ручку настройки яркости, в случае отсутствия встроенной подсветки, поставить плоское зеркало.
    · Поместить на столик микроскопа исследуемый препарат и установить в фокусе сухой объектив (10х) на расстояние несколько меньше свободного рабочего расстояния.
    · Глядя в окуляр, произвести предварительную установку освещения с помощью ручки настройки яркости (или вращая зеркалом).
    · Медленно поднимая тубус макровинтом, добиться резкого изображения препарата.
    · Поставив сухой (40х) или иммерсионный (100х) объектив, опускать тубус микроскопа под контролем глаза, глядя сбоку. Опустить объектив на расстояние меньше свободного рабочего и, глядя в окуляр, макровинтом медленно поднимать тубус до тех пор, пока не появится мелькание препарата. Точная установка достигается с помощью микровинта. Не следует делать микровинтом более половины оборота в одну или другую сторону.

    Микроскопия неокрашенных объектов
    При работе с нативным материалом необходимо соблюдать два основных принципа: не загрязнить исследуемый объект микроорганизмами, не заразить себя и окружающую среду. При микроскопии необходимо помнить, что рассматривание неокрашенного препарата возможно только с ограниченным освещением, путем опускания конденсора или уменьшением отверстия ирис-диафрагмы. Для микроскопии неокрашенных объектов используется окуляр 10х и объектив 10х.
    При освещении с помощью встроенной подсветки осветителя или плоского зеркала ирис-диафрагма частично закрыта, конденсор опущен. С помощью макровинта устанавливается поле зрения и проводится обзор препарата. С целью обнаружения объекта все нативные (неокрашенные) препараты просматривают под малым увеличением с помощью макровинта. Для лучшего рассмотрения объекта или его отдельных фрагментов используется сухой объектив с увеличением 40х и освещенность, с помощью поднятия конденсора и открытия ирис-диафрагмы под контролем глаза.

    Микроскопия окрашенных объектов
    При микроскопии окрашенного препарата необходимо помнить, что рассматривание возможно только при полном освещении. Для микроскопии окрашенных объектов используется окуляр 10х и объектив 10х.
    Ирис-диафрагма открыта, конденсор поднят. С помощью макровинта устанавливается поле зрения и проводится обзор препарата. Достигается максимальное освещение препарата. При малом увеличении делается обзор препарата для обнаружения четко выраженных полей зрения. Изучение препарата проводится под большим увеличением с применением сухой системы объектив 40х. Для микроскопии окрашенных препаратов биологической жидкости, мокроты, биологического материала применяется иммерсионная система объектив 100х с нанесением на предметное стекло иммерсионного масла.

    Метод люминесцентной микроскопии
    Люминесценция, основа многих современных методов биологических исследований, позволяет наблюдать за взаимоотношениями молекул внутри клеток.
    Фактором качественной работы для всех методов люминесцентных исследований является скорость.
    Основной целью современной люминесцентной микроскопии является визуализация всех измерений объекта.
    Метод с большим эффектом может быть использован для ускорения диагностики ряда заболеваний.
    Люминесцентная микроскопия основана на способности некоторых веществ светиться под действием коротковолновых лучей света. При этом длина волны излучаемого при люминесценции света всегда будет больше, чем длина волны света, возбуждающего люминесценцию. Так, если освещать объект синим светом, он будет испускать лучи красного, оранжевого, желтого или зеленого цвета.
    Препараты для люминесцентной микроскопии окрашивают специальными светящимися люминесцентными красителями – флуорохромами. Центральная часть клеток и присутствующие в препарате посторонние микробные клетки не светятся.
    Ускоренная диагностика, идентификация возбудителя, обнаружение специфических антител в биологическом материале, биологической жидкости и во внешней среде осуществляется методами МФА, МИФ с применением люминесцирующих сывороток:
    - иммуноглобулины диагностические туляремийные люминесцирующие – диагностика туляремии;
    - иммуноглобулины диагностические бруцеллезные люминесцирующие – диагностика бруцеллеза;
    -иммуноглобулины диагностические сибиреязвенные соматические люминесцирующие – диагностика сибирской язвы;
    -иммуноглобулины диагностические сибиреязвенные антиспоровые адсорбированные флуоресцирующие – диагностика сибирской язвы;
    -иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие холерные адсорбированные лошадиные – диагностика холеры;
    - антигенный препарат с хантавирусным антигеном - диагностика ГЛПС;
    - иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие для быстрой диагностики гриппа, ОРВИ.
    Антигены, вирусы гриппа и другие возбудители ОРВИ в инфицированных клетках по их характерной локализации выявляются в результате взаимодействия антигенов с противовирусными антителами, маркированными флуоресцеинизотиоцианатом, методом МИФ. Метод иммунофлуоресцентного анализа (МИФ) является высоко чувствительным и специфичным качественным иммунодиагностическим тестом. К числу преимуществ метода относится его исключительная простота и возможность быстрого (за 1-2 часа) анализа клинических материалов с распознаванием широкого круга возбудителей, включая вирусы гриппа, парагриппа, респираторно-синцитиальный вирус, коронавирусы, аденовирусы, вирусы герпеса.

    Источник: http://www.cgekuban.ru/publication/ilc/micro.php

    Общий метод: наблюдение. Частный метод: микроскопирование.

    Видео: Наблюдение коралла под лазерным сканирующим конфокальным микроскопом.

    Christine E. Farrar, Zac H. Forsman, Ruth D. Gates, Jo-Ann C. Leong, and Robert J. Toonen, Hawai'i Institute of Marine Biology at the University of Hawai'i, Manoa

    No dyes or digital software produced the brilliant color of these corals—the glory is all their own. Fluorescent molecules, innate to the corals and to the red algae that live inside and nourish them, shine like Christmas lights under different wavelengths of light emitted by a confocal microscope.

    When she saw the corals under the lens for the first time, "my jaw just dropped," says Ruth Gates, a coral biologist at the University of Hawai'i, Manoa, and the narrator of the video. "Most people think corals are inanimate rocks," she says. "We showcase how beautiful and dynamic they are as animals." In the video, which compiles the images into three-dimensional, time-lapse animations, corals extend and retract their glowing tentacles. Tiny creatures crawl over the corals, all part of a complex and threatened ecosystem. In the future, Gates says, it might be possible to use confocal microscopy to classify different coral species or diagnose coral disease by their fluorescent patterns. Prior to applying this technique, she says, "that was not even a facet in our thinking about coral biology."

    Что такое микроскопия? | Эдинбургский университет

    Микроскопия - это техническая область использования микроскопов для просмотра образцов и объектов, которые нельзя увидеть невооруженным глазом (объекты, которые находятся за пределами диапазона разрешения нормального глаза).

    Что такое микроскопия и для чего она нужна?

    Световая микроскопия - это общий термин, используемый для любого типа микроскопии, где свет передается от источника, находящегося на противоположной стороне образца, на линзу объектива.Обычно свет проходит через конденсор, чтобы сфокусировать его на образце и получить максимальную яркость. После того, как свет прошел через образец, он проходит через линзу объектива, чтобы увеличить изображение образца, а затем попадает в окуляры, где просматривается увеличенное изображение.

    Техники световой микроскопии значительно развились за последние 20 лет и теперь представляют собой незаменимый инструмент для изучения молекулярных событий на субклеточном уровне с целью получения временной и пространственной информации с высоким разрешением.Для достижения оптимальных результатов важно тщательно планировать и проводить эксперименты на основе микроскопии, что требует понимания хотя бы основ клеточной биологии, пробоподготовки и флуоресцентной световой микроскопии.

    Микроскопы исследуют взаимосвязь между структурами и свойствами самых разных материалов, от мягких до очень твердых, от неодушевленных материалов до живых организмов, чтобы лучше понять их поведение.

    Ознакомьтесь с кратким курсом по световой микроскопии.
    .

    Что такое микроскопия? (с иллюстрациями)

    Микроскопия - это научная дисциплина, в которой используются увеличивающие объекты, которые нельзя увидеть невооруженным глазом. Цель этой области науки - сделать эти объекты видимыми для изучения, что позволит исследователям больше узнать о них и о том, как они работают. Существует множество различных типов микроскопии и бесчисленное множество ее применений. Биология, в частности, в значительной степени полагается на микроскопию для сбора информации, и этот научный инструмент ежедневно используется во всем мире, от научных лабораторий средней школы до Центров по контролю за заболеваниями.

    Предметные стекла используются для удержания образцов на лотках микроскопа во время исследования.

    Корни микроскопии уходят в 1600-е годы, когда ученые и инженеры впервые начали разрабатывать линзы со значительным увеличением, позволяющие людям видеть вещи, которые раньше были невидимы.Взрыв интереса произошел, когда исследователи начали документировать «анималкулы», иначе известные как микроорганизмы, во всем, от питьевой воды до слюны. Осознание того, что миниатюрный мир существует без ведома людей, заставило исследователей усовершенствовать свои линзы и методы микроскопии, чтобы получить лучшее увеличение и более высокое разрешение изображения.

    Женщина под микроскопом.

    Оптическая микроскопия, использующая видимый свет, была первой формой, которая была внедрена. Его также иногда называют «световой микроскопией». Многие люди, посещавшие занятия по естествознанию, использовали его, чтобы смотреть на организмы под микроскопом.С помощью электронной микроскопии, изобретения 20-го века, ученые сканируют объект с помощью электронного луча. Этот тип обеспечивает отличное увеличение, но оборудование стоит дорого, и образцы должны быть подготовлены очень точно, чтобы получить полезные результаты.

    Под микроскопом видны три парамеции.

    Другой метод, сканирующая зондовая микроскопия, использует ручной зонд для сбора информации об исследуемом объекте. Он может быть более универсальным, чем электронная микроскопия, с несколькими типами датчиков, доступными для различных приложений.

    Встроенные цифровые микроскопы оснащены монитором вместо окуляра для просмотра образцов.

    Во всех случаях взгляд на образец - это только начало. Исследователь может подготовить образец, окрашивая его или подвергая его химическим реакциям, чтобы узнать о нем больше, как это делают биологи, подвергая неизвестные бактерии окрашиванию по Граму. Микроскопы также могут использоваться, чтобы помочь исследователям с вскрытием и другими задачами, в которых они хотят исследовать внутреннюю работу организма.

    Оптические микроскопы могут быть очень доступными по цене и могут стать отличным средством обучения для людей, интересующихся наукой. Начинающие ученые часто высоко ценят дар микроскопа для исследования окружающего мира, им также может понравиться работа с такими аксессуарами, как камеры микроскопа.

    Микроскопия - это просто научная дисциплина, заключающаяся в использовании микроскопа для просмотра объектов, слишком маленьких для изучения невооруженным глазом..

    различных типов микроскопов и их применения

    Существует несколько различных типов микроскопов, каждый из которых решает уникальные задачи. Ниже вы найдете информацию о пяти различных типах микроскопов, а также приложениях для каждого микроскопа и о том, кто может использовать каждый прибор. Ниже каждого описания микроскопа и его использования приводится изображение, полученное с помощью этого конкретного микроскопа.

    Микроскопы 5 различных типов:

    1. Стереомикроскоп
    2. Составной микроскоп
    3. Инвертированный микроскоп
    4. Металлургический микроскоп
    5. Поляризационный микроскоп

    Стереомикроскопы

    Стереомикроскопы используются для изучения различных образцов, которые можно держать в руке.Стереомикроскоп обеспечивает трехмерное изображение или «стерео» изображение и обычно обеспечивает увеличение от 10 до 40 раз. Стереомикроскоп используется в производстве, контроле качества, коллекционировании монет, науке, в школьных проектах по вскрытию и ботанике. Стереомикроскоп обычно обеспечивает как проходящее, так и отраженное освещение и может использоваться для просмотра образца, который не позволяет свету проходить через него.

    Следующие образцы часто просматриваются под стереомикроскопом: монеты, цветы, насекомые, пластиковые или металлические детали, печатные платы, тканевые переплетения, анатомия лягушки и провода.

    Это изображение пенни было получено с помощью стереомикроскопа для сбора монет с 20-кратным увеличением.


    Составные микроскопы

    Составной микроскоп может также называться биологическим микроскопом. Составные микроскопы используются в лабораториях, школах, на очистных сооружениях, в ветеринарных кабинетах, а также для гистологии и патологии. Образцы, просматриваемые под сложным микроскопом, должны быть приготовлены на предметном стекле микроскопа с использованием покровного стекла для выравнивания образца.Студенты часто просматривают подготовленные слайды под микроскопом, чтобы сэкономить время, исключив процесс подготовки слайдов.

    Составной микроскоп можно использовать для просмотра различных образцов, некоторые из которых включают: клетки крови, клетки щек, паразитов, бактерии, водоросли, ткани и тонкие срезы органов. Составные микроскопы используются для просмотра образцов, которые нельзя увидеть невооруженным глазом. Увеличение составного микроскопа обычно составляет 40x, 100x, 400x, а иногда и 1000x.Микроскопы, рекламирующие увеличение выше 1000x, не следует покупать, поскольку они предлагают пустое увеличение с низким разрешением.

    Это изображение спор грибов было получено под сложным биологическим микроскопом при 400-кратном увеличении.

    Микроскопы инвертированные

    Инвертированные микроскопы доступны как биологические инвертированные микроскопы или металлургические инвертированные микроскопы. Биологические инвертированные микроскопы обеспечивают увеличение 40x, 100x, а иногда и 200x и 400x.Эти биологические инвертированные микроскопы используются для просмотра живых образцов, находящихся в чашке Петри. Инвертированный микроскоп позволяет пользователю разместить чашку Петри на плоском предметном столике с линзами объектива, расположенными под предметным столиком. Инвертированные микроскопы используются для экстракорпорального оплодотворения, визуализации живых клеток, биологии развития, клеточной биологии, нейробиологии и микробиологии. Инвертированные микроскопы часто используются в исследованиях для анализа и изучения тканей и клеток, в частности живых клеток.

    Металлургические инвертированные микроскопы используются для исследования крупных деталей при большом увеличении на предмет трещин или дефектов.Они похожи на биологический инвертированный микроскоп по предоставленному увеличению, но одним из основных отличий является то, что образцы не помещаются в чашку Петри, а необходимо подготовить гладкую сторону образца, чтобы он мог лежать на предметном столике. Этот гладкий образец полируется и иногда называется шайбой.

    Микроскопы металлургические

    Металлургические микроскопы - это микроскопы с большим увеличением, предназначенные для просмотра образцов, не пропускающих свет.Отраженный свет проходит через линзы объектива, обеспечивая увеличение в 50, 100, 200, а иногда и 500 крат. Металлургические микроскопы используются для изучения трещин микронного уровня в металлах, очень тонких слоев покрытий, таких как краска, и определения размера зерна.

    Металлургические микроскопы используются в аэрокосмической промышленности, автомобилестроении, а также компаниями, занимающимися анализом металлических конструкций, композитов, стекла, дерева, керамики, полимеров и жидких кристаллов.

    Это изображение куска металла с царапинами на нем было получено под металлургическим микроскопом при 100-кратном увеличении.

    Поляризационные микроскопы

    Поляризационные микроскопы используют поляризованный свет вместе с проходящим и / или отраженным освещением для исследования химических веществ, горных пород и минералов. Поляризационные микроскопы ежедневно используются геологами, петрологами, химиками и фармацевтической промышленностью.

    Все поляризационные микроскопы имеют поляризатор и анализатор. Поляризатор пропускает только определенные световые волны.Анализатор определяет количество света и направление света, который будет освещать образец. Поляризатор в основном фокусирует свет с разными длинами волн в одной плоскости. Эта функция делает микроскоп идеальным для просмотра материалов с двойным лучепреломлением.

    Это витамин С, полученный под поляризационным микроскопом при 200-кратном увеличении.

    Если вы не уверены, какой тип микроскопа лучше всего подходит для вашей области применения, обратитесь в Microscope World.

    .

    Microscopy UK / Micscape - Библиотека статей по микроскопии

    Категории - по алфавиту
    Щелкните ссылку, чтобы просмотреть все статьи в категории
    Используйте кнопку «Назад» или ссылку, чтобы вернуться Вот.

    Начинающий
    Обзоры для хобби и микроскопа. Для введения по другим темам см. Конкретную категорию.
    Биология - генеральный
    Классификация, беспозвоночные и структура, раковины, микропалеонтология и др.
    Биографии / Некрологи Ботаника
    Биология растений, цветущих и нецветущих растения, грибы.
    Открытия
    Новый вид.
    Общие
    история, старые слайды, встречи, люди, техника, общие науки и др.
    Насекомые - вши, блохи, пчелы, осы, муравьи, жуки, бабочки, стрекозы и др. Морской
    'Forams', радиолярии, диатомеи, беспозвоночные, песок.
    Микроскопы
    Модели / производители - современные и исторические, портативные устройства, оптика, запросы и т. д. Ресурсы Foldscope.
    Пруд жизнь
    Обзоры, погружение в виртуальный пруд, введение на основные группы, статьи по конкретным родам / видам
    Популярные / нестандартный
    Баги, чудовища, наводящие на размышления.
    отзывов
    Книги, программное обеспечение.
    Пауки и клещи
    Также другие членистоногие
    Методы - различный
    Projects, Микроскоп Открытого университета моды, советы по сбору и наблюдению и т. д.
    Методы - освещение (переклассифицировано)
    Darkfield, фаза, падающая, полярная, наклонная и COL, Светодиоды, флуоресценция / автофлуоресценция, ДИК и др.
    Методы - микротехника
    Подготовка слайдов и образцов, лаборатория.оборудование и др.
    Методы - микрофотография пленочной камерой Методы - цифровое и видеоизображение
    Макро и микроскопия.
    Micscape Lite Рочестерский технологический институт, штат Нью-Йорк, статьи студентов ежегодных макро-курсов
    .

    Световая микроскопия

    Световой микроскоп, названный так потому, что он использует видимый свет для обнаружение мелких объектов, вероятно, наиболее известное и широко используемое исследование инструмент в биологии. Тем не менее, многие студенты и учителя не знают о полной ряд функций, доступных в световых микроскопах. Поскольку стоимость инструмента увеличивается с его качеством и универсальностью, лучшие инструменты, к сожалению, недоступны для большинства академических программ.Однако даже самые недорогие «студенческие» микроскопы могут обеспечивают захватывающий вид на природу и могут позволить студентам выполнять несколько достаточно изощренных экспериментов.

    Новичок склонен думать, что проблема просмотра мелких объектов заключается в получении достаточного увеличения. На самом деле, когда дело доходит до поиска в живых существах самые большие проблемы, по порядку,

    • получение достаточного контраста
    • поиск фокальной плоскости
    • с хорошим разрешением
    • распознавание предмета, когда его видят

    Самые маленькие объекты, которые считаются живыми, - это бактерии.Наблюдать за мельчайшими бактериями и определять форму клеток можно на всего лишь 100-кратное увеличение. Они не видны в светлопольных микроскопах, хотя. На этих страницах будут описаны типы оптики, которые используются для получения контраст, предложения по поиску образцов и сосредоточению на них, и советы по использованию измерительных приборов со световым микроскопом.

    Виды световых микроскопов

    Светлопольный микроскоп лучше всего известен студентам и, скорее всего, быть найденным в классе.Лучше оборудованные классы и лаборатории могут иметь темнопольная и / или фазово-контрастная оптика. Дифференциальный интерференционный контраст, Контраст и вариации модуляции Номарского, Хоффмана дают значительные глубина разрешения и трехмерный эффект. Флуоресценция и конфокальные микроскопы - специализированные инструменты, используемые для исследований, клиническое и промышленное применение.

    Кроме составного микроскопа, более простой прибор для малого увеличения также можно найти применение в лаборатории.Стереомикроскоп или рассечение микроскоп обычно имеет бинокулярный окуляр, большое рабочее расстояние, и диапазон увеличения обычно от 5x до 35 или 40x. Некоторые инструменты поставьте линзы для большего увеличения, но улучшения нет в разрешении. Такое «ложное увеличение» редко стоит расход.

    Светлопольная микроскопия

    В обычном светлопольном микроскопе свет от лампы накаливания источник направлен на линзу под столиком, называемую конденсатором, через образец, через линзу объектива и в глаз через вторая увеличительная линза, окуляр или окуляр.Мы видим объекты в световой путь, потому что естественная пигментация или пятна по-разному поглощают свет, или потому что они достаточно толстые, чтобы поглощать значительное количество света несмотря на то, что он бесцветный. Paramecium должен появиться справедливо хорошо в светлопольном микроскопе, хотя разглядеть будет непросто реснички или большинство органелл. Живые бактерии вообще не появятся, если зритель случайно попадает в фокальную плоскость и искажает изображение, используя максимальная контрастность.

    Микроскоп хорошего качества имеет встроенный осветитель, регулируемый конденсор. с регулировкой апертурной диафрагмы (контрастности), механическим столиком и биноклем окулярный тубус. Конденсор используется для фокусировки света на образце через отверстие в сцене. Пройдя через образец, свет отображается для глаза с видимым полем, которое намного больше, чем область освещена. Увеличение изображения - это просто цель увеличение линзы (обычно нанесенное на корпусе линзы), умноженное на окуляр увеличение.

    Студенты обычно знают об использовании грубой и точной фокусировки. ручки, используемые для повышения резкости изображения образца. Они часто не знают о настройках конденсатора, которые могут повлиять на разрешение и контраст. Некоторые конденсаторы фиксируются, другие настраиваются, так что качество света можно регулировать. Обычно лучшая позиция ибо фокусируемый конденсатор максимально приближен к сцене. Яркий полевой конденсатор обычно содержит апертурную диафрагму, устройство, которое контролирует диаметр светового луча, проходящего через конденсатор, так что, когда диафрагма остановлена ​​(почти закрыта), свет проходит прямо через центр линзы конденсора и контрастирует в приоритете.Когда диафрагма широко открыта, изображение становится ярче и контрастнее. низкий.

    Недостаток использования только апертурной диафрагмы для Контрастность заключается в том, что чем выше оптимальная точка, тем больше контраста вы производите тем больше искажаешь изображение. С небольшим, неокрашенным, непигментированным образец, вы обычно выходите за рамки оптимального контраста, когда начинаете видеть изображение.

    Использование светлопольного микроскопа

    Сначала подумайте, что вы хотите делать с микроскопом.Что такое какое максимальное увеличение вам понадобится? Вы смотрите на запятнанный образец? Какой контраст / разрешение вам нужно? Далее приступаем к настройке вверх для просмотра.

    Установите образец на предметный столик

    Покровное стекло должно быть вверху, если оно есть. Объектив с большим увеличением линзы не могут фокусироваться через толстое предметное стекло; их нужно принести близко к образцу, поэтому покровные стекла такие тонкие. Уровень могут быть оснащены простыми зажимами (менее дорогие микроскопы) или какой-то тип держателя слайдов.Слайд может потребовать ручного позиционирования, или может быть механический столик (предпочтительно), который позволяет точное позиционирование не касаясь слайда.

    Оптимизировать освещение

    Источник света должен иметь широкий динамический диапазон, чтобы обеспечивать высокую интенсивность освещение при большом увеличении и меньшей интенсивности, чтобы пользователь может удобно просматривать при небольшом увеличении. Лучшие микроскопы имеют встроенный осветитель, а в лучших микроскопах есть контроль над светом интенсивность и форма светового луча.Если вашему микроскопу требуется внешний источник света, убедитесь, что свет направлен к середине конденсатора. Отрегулируйте освещение так, чтобы поле было ярким без болят глаза.

    Регулировка конденсатора

    Для настройки и юстировки микроскопа сначала прочтите руководство. Если руководства нет, попробуйте использовать эти рекомендации. Если конденсатор фокусируется, расположите его линзой как можно ближе к отверстию в этап, как вы можете это получить.Если у конденсатора есть выбираемые опции, установите это светлое поле. Начните с закрытой апертурной диафрагмы (высокий контраст). Вы должны увидеть свет, который проникает сквозь образец изменяйте яркость при перемещении рычага апертурной диафрагмы.

    Подумайте, что вы ищете

    Намного труднее найти что-то, когда у вас нет ожиданий, как к его появлению. Насколько это велико? Он будет двигаться? Пигментированный или морилка, и если да, то какого она цвета? Где вы ожидаете найти это на слайде? Например, у студентов обычно много проблем. обнаружение окрашенных бактерий невооруженным глазом и при малом увеличении материал выглядит как грязь.Полезно знать, что по мере высыхания мазков они обычно оставляют кольца так, чтобы край мазка был наиболее плотным концентрация клеток.

    Сфокусируйте, найдите и отцентрируйте образец

    Начните с объектива с наименьшим увеличением, чтобы сосредоточиться на образец и / или часть образца, которую вы хотите исследовать. Это скорее легко найти и сфокусировать внимание на срезах тканей, особенно если они фиксированные и окрашенные, как и в большинстве подготовленных слайдов.Однако это может быть очень трудно найти живые мелкие образцы, такие как бактерии или непигментированные протисты. Суспензия дрожжевых клеток - хороший образец для практики. для поиска сложных предметов.

    • Используйте режим темного поля (если есть) для поиска неокрашенных образцов. Если нет, начните с высокой контрастности (закрытая апертурная диафрагма).
    • Начните с того, что образец не в фокусе, так что предметный столик и объектив должны быть сближены.Первая поверхность, попавшая в фокус когда вы соединяете сцену и цель, это верх покровного стекла. При мазках покровное стекло часто не используется, поэтому первым делом вы видите это сам мазок.
    • Если у вас возникли проблемы, сфокусируйтесь на краю покровного стекла или воздушный пузырь или что-то, что вы легко узнаете. Вершина сначала в фокус попадает край покровного стекла, затем нижний, который должен находиться в той же плоскости, что и ваш образец.
    • Как только вы найдете образец, отрегулируйте контраст и интенсивность освещение, и перемещайте слайд, пока не получите хорошую область для просмотра.
    Регулировка разделения окуляров, фокусировка

    С одним окуляром ничего общего с окуляром, кроме держать его в чистоте. С бинокулярным микроскопом (предпочтительно) вам необходимо отрегулируйте расстояние между окулярами, как в бинокль. Бинокулярное зрение намного более чувствительно к свету и деталям, чем монокулярное. зрение, поэтому, если у вас есть бинокулярный микроскоп, воспользуйтесь им.

    Один или оба окуляра могут быть телескопическими, т. Е. вы можете сфокусировать это. Поскольку у очень немногих людей глаза идеально совпадает, большинству из нас необходимо сфокусировать один окуляр, чтобы соответствовать другому изображению. Посмотрите соответствующим глазом в фиксированный окуляр и сфокусируйтесь ручку фокусировки микроскопа. Затем посмотрите в регулируемый окуляр (с другой глаз, конечно) и настройте окуляр, а не микроскоп.

    Выбрать объектив для просмотра

    Объектив с наименьшим увеличением обычно равен 3.5 или 4x, и используется в основном для первоначально находя экземпляры. Мы иногда называем это сканирующим объективом для по этой причине. Наиболее часто используемый объектив - это объектив 10x, что дает окончательное 100-кратное увеличение с 10-кратным окуляром. За очень маленькие протисты и детали на подготовленных слайдах, например, клеточные органеллы или митотические фигуры, вам потребуется большее увеличение. Типичный высокий линзы увеличения: 40x и 97x или 100x. Последние два увеличения используются исключительно с маслом для улучшения разрешения.

    Увеличение ступенчато вверх. Каждый раз, когда вы переходите к высшей силе объектив, перефокусируйте и отцентрируйте образец. Более высокое увеличение линзы должны быть физически ближе к самому образцу, который создает риск заклинивания объектива в образце. Будьте очень осторожны при фокусировке. Кстати, качественные комплекты линз парфокальные, то есть при переключении увеличений образец остается в фокусе или близко к сосредоточенному.

    Больше не всегда лучше. Все образцы имеют три измерения и если образец не слишком тонкий, вы не сможете сфокусироваться с объектив с большим увеличением. Чем больше увеличение, тем сложнее это «преследование» движущегося образца.

    Регулировка освещенности для выбранной линзы объектива

    Видимое поле окуляра постоянно, независимо от увеличения. используемый. Отсюда следует, что при увеличении увеличения область освещенного образец, который вы видите, меньше.Поскольку вы смотрите на меньшую площадь, меньше света достигает глаза, и изображение темнеет. С объективом с низким энергопотреблением возможно, вам придется снизить интенсивность освещения. С большой мощностью вам нужен весь свет, который вы можете получить, особенно с менее дорогими микроскопами.

    Когда использовать светлопольную микроскопию

    Светлопольная микроскопия лучше всего подходит для просмотра окрашенных или естественных пигментированные образцы, такие как окрашенные подготовленные слайды срезов тканей или живые фотосинтезирующие организмы.Для живых экземпляров бесполезен бактерий и хуже для нефотосинтезирующих простейших или многоклеточных животных, или неокрашенные клеточные суспензии или срезы тканей. Вот не совсем полный список образцов, которые можно наблюдать с помощью светлопольной микроскопии, и соответствующее увеличение (подчеркнуты предпочтительные конечные увеличения).

    • Готовые предметные стекла, окрашенные - бактерии (1000x), срезы толстых тканей (100x, 400x), тонкие срезы с конденсированными хромосомами или специально окрашенные органеллы (1000x), крупные протисты или многоклеточные животные (100x).
    • Мазки, окрашенные - кровь (400x, 1000x), отрицательно окрашенные бактерии (400x, 1000x).
    • Живые препараты (влажные, неокрашенные) - прудовая вода (40x, 100x, 400x), живые простейшие или многоклеточные (40x, 100x, иногда 400x), водоросли и другой микроскопический растительный материал (40x, 100x, 400x). Меньше экземпляры будет сложно наблюдать без искажений, особенно если у них нет пигментации.
    Уход за микроскопом
    • ВСЕ на качественном микроскопе невероятно дорого, так что будьте осторожны.
    • Крепко держите микроскоп только за подставку. Никогда не хватай его за держатель окуляра, например.
    • При отсоединении осветителя держитесь за вилку (а не за кабель).
    • Поскольку лампы дорогие и имеют ограниченный срок службы, включите осветитель. выключите, когда закончите.
    • Перед тем, как убрать предмет, убедитесь, что предметный столик и линзы чистые. микроскоп.
    • НИКОГДА не используйте бумажное полотенце, кимвип, рубашку или другие материалы. чем качественная салфетка для линз или ватный тампон (должен быть на 100% натуральным хлопок) для очистки оптической поверхности.Быть нежным! Вы можете использовать соответствующий очиститель линз или дистиллированная вода для удаления засохшего материала. Органический растворители могут разъединить или повредить линзы или покрытия.
    • Накройте прибор суперобложкой, когда он не используется.
    • Фокус плавно; не пытайтесь ускорить процесс фокусировки или заставить что-нибудь. Например, если вы столкнулись с повышенным сопротивлением, когда сосредоточившись, то вы, вероятно, достигли предела и собираетесь неправильное направление.

    .

    Смотрите также